——0. PCR簡介——
聚合脢連鎖反應 (Polymerase Chain Reaction, 以下縮寫為PCR) 是凱利‧穆利斯 (Kary Mullis)於1983年發明的分子生物學技術，能夠在生物體外將極少量的去氧核糖核酸 (DeoxyriboNucleic Acid，以下縮寫為DNA) 擴增至數百萬甚至數億倍的濃度，以利於後續分析的進行。由於這項技術在每個循環必須升溫至攝氏95℃，DNA聚合脢在此溫度下會被破壞，因此早期的PCR技術全程（約數小時）必須有人力添加酵素，效率十分低落。直到生存於溫泉中的嗜熱細菌體內的Taq聚合脢被發現後，由於此酵素可耐高溫，因此PCR技術才得以機器進行，時間及人力都大幅縮短。
PCR中涉及的藥品，至少有6-8項：1. DNA。 2. Taq聚合脢。3. 引子(primer)。4. 脫氧核苷酸三磷酸 (dNTP)。5. PCR緩衝液。6. 二次水 (ddH2O)。7. 牛血清蛋白 (bovine serum albumin, BSA, 使引子與DNA容易黏和)。8. 鎂離子 (Mg2+)，通常使用氯化鎂 (MgCl2)。其中第7-8項視實驗需求可加可不加。
PCR簡介：
http://zh.wikipedia.org/w/index.php?title=PCR&variant=zh-tw
——1. 我的實驗 part 1——
「作實驗」這檔子事情，是大多數理工科學生脫離不了的惡夢……不，是獲取知識的必要途徑，而處在一個研究植物分類及親緣關係的實驗室，PCR就成為許多人必須學習的實驗技術之一。
但今年初（實際開始日期大約是去年最後幾天）發生了一件非常離奇的事情，實驗室所有需要操作PCR的人的實驗都作不出來，口語是：「P不出來」。所以在實驗室內會聽到如下的對話：A：你剛剛P得怎樣？B：沒P出來，我已經好幾天P不出來了。
聽起來就好像便秘無法如廁一般。由於是所有的人都作不出來，因此問題的禍源可能發生在公用的藥品或器材，正好此時負20℃冰箱出了狀況，因此矛頭便指向了它。最可憐的是josefina，她有些藥品對於溫度的變化是極其敏感的，一而再的升溫可能使她的特定藥品失去活性，因此這段期間她的哀嚎也最為慘烈。
「P不出來」的現象持續了一週左右，接著，我又P得出來了，問題癥結不明，因為我的藥品對溫度變化並非特別敏感，而之前的交叉測試看來，公用藥品也未受污染或失去活性。不過P得出來已經是期末考週了，所以得挪用一些時間來唸書。而josefina為了實驗作不出來這件事情，還特地跑去拜拜，拜完後隔天，當兵的phloem放假回學校，告訴她試著不要加BSA，果然問題迎刃而解。所以，拜拜是有用的，更重要的是要拜對人。 :p
——2. 進度報告——
實驗室每個學期會進行2-3次的進度報告，每個研究生有15-30分鐘報告加討論的時間，讓老師知道大家的實驗進度，也藉由討論讓其他成員提供建議以協助研究進行。而進度報告前一個月左右，就是大家密集作實驗的時段了。
學期末的進度報告訂在1月21日。報告前兩天，天空真是藍得無法再藍了，可惜大家都只能哀怨地躲在實驗室裡作報告。先和實驗室幾個人約22號要出門走走，地點選在桶後林道及大、小礁溪山。不過呢……等一下再告訴你。
受到年初那一週作不出實驗的影響，在進度報告前我一共只試出了3個葉綠體的片段，然而都沒有變異。報告時學長指出，我的前測方式有瑕疵，因為我是各地區抽兩個樣本來定序，這樣有可能每個地區抽到的都是主要的基因型。舉個例子來說吧，假設我從台北、新竹、台中、嘉義、台南、高雄各找了5個人來抽血，可能這6個城市的5個人都是O型、Rh陰性，我就會得到所有城市的人的血型都沒有變異的結論。但若我單獨從台北找了30個人抽血，可能就會發現有24個人是O型、3個A型、2個B型、1個AB型；29個Rh陰性、1個Rh陽性。由於「O型、Rh陰性」這樣的組合比例非常高，所以當我採樣不足時，很可能取到的都是最常見的類型。回到我自己的研究題目，我應該採取的方式是同一個地區的族群多取一些樣本，而非每個地區取少數的樣本來作前測。
——3. 我的實驗 part 2——
原本的好天氣在進度報告的中午開始變化，22號早上起床時還飄著雨，所以當josefina打電話來morning call時只好告訴她，還是延期吧。聽得出來話筒的另一端有種哀怨。更恨的是，雨勢大約9點多停止了，中午甚至陽光微露。可是，這又有誰能料得到呢？
進度報告完後，等於正式放寒假，所以不受上課的影響，可以全心作實驗。當天晚上開始抽DNA，這可是一件大工程，不像PCR可以放給機器去跑，而是全程都必須人工處理。當天我抽了41個樣本，從晚上9點半一直弄到凌晨4點多才結束，最後去吃早餐、回住處洗澡的時間，大約與我上次離開住處的時間差不多吧。
早上10點又回實驗室，作了一批PCR，又作不出來了。接下來有6天的時間，PCR沒有任何產物，連先前曾經P出來的片段再重新測試也一樣。先前提過的，PCR涉及藥品有6-8項，如果要作交叉測試的話，至少有64種組合！一次這樣做下來就手軟了，當然不會一次測試所有的條件，而是從最可能受污染或失去活性的藥品開始測試，於是我換了Taq聚合脢、二次水、引子、dNTP、BSA……，全‧部‧都‧沒‧有‧產‧物。
有兩次，一天作3次PCR，一大早趁大家都還沒到實驗室就先去配藥品，測試不同的片段和藥品，結果半天下來一百多管都沒有產物（那兩天加起來大約有2百管左右），其心情低落是可想而知的；甚至隔天早上到了實驗室也不知道究竟要不要作實驗呢？想到很可能依然沒有結果就覺得心灰意冷。後來又跟ophior借了她的樣本和引子，也借了一管給jayron請他用他的藥品幫我作，結果一樣，全‧部‧都‧沒‧有‧產‧物。在日記裡寫著：「已經到了不知道該怎麼解釋的地步了。只剩下PCR緩衝液還沒換過。」這是最不容易失去活性的藥品了，而且各自保存，受污染的機會也很低。
此時的心情就像進度報告後的天氣一樣，連日陰雨。
28號，早上實驗室有兩位碩士生口試，過程相當順利。接著下午大掃除。利用口試完後、大掃除前的一個小時的空檔，重新配了一次PCR的藥品，說實話，心裡是不抱著任何期待的。沒想到，晚上跑完電泳膠片後，竟然有產物！心裡的感動真是莫可言喻，沒想到問題果真出現在PCR緩衝液！
接下來的PCR就順利多了，雖然綿綿細雨依舊持續著，不過我早已不管這件事了。這時候心裡響起的是鄭怡的「心情」：當結局出現喜劇 外面在下雨 可是我心中有太陽。
——4. 其它小插曲——
1月29日中午，非常難得地出現了蔚藍的天空，Asarum才說打算明天去霞喀羅走走，沒想到過沒幾個小時天空又烏雲密佈了起來。
1月30日，心情很好，中午利用空檔去「台大毀容部」剪頭髮，順便更換沒電已久的手錶電池，理髮過年前漲價一倍：240元，手錶電池兩顆：200元，心痛的感覺：無價。話說KAKU日常生活花費每日都不到200元，沒想到只是跨過基隆路短短不到1個小時就花了將近500元。應該兩週前在台大考族群遺傳期末考那天就順便把頭髮理一理的，這次體驗到什麼叫做「過年加成」，下回無論如何一定要避開這個時段。
晚上有一場「12600KM無車旅行」的分享會，其中一個講者是認識的朋友頭頭。原本想應該騎自行車去聽自行車旅行的分享，不過雨勢未曾停歇，後來仍然決定騎摩托車去罷。
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北京到巴黎無車探險：
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